Современная урологическая практика всё чаще сталкивается с проблемами патологии предстательной железы, которые не только увеличиваются количественно, но и приобретают всё большую социальную значимость. По данным многочисленных эпидемиологических исследований, проведенных в разных странах мира, хронический простатит занимает лидирующие позиции среди воспалительных заболеваний мужской репродуктивной системы. Согласно недавней статистике, около 35-40% мужчин трудоспособного возраста страдают от тех или иных проявлений простатита, что делает данную проблему не только медицинской, но и социально-экономической.
Ключевая сложность в лечении хронического простатита обусловлена многофакторностью его этиопатогенеза, включающего нарушения микроциркуляции, застойные явления в ацинусах, изменения биохимических и бактерицидных характеристик секрета простаты, развитие аутоиммунных реакций и ослабление барьерной функции железы. Всё это создаёт благоприятные условия для инфицирования и хронизации воспалительного процесса. Кроме того, длительно существующий простатит негативно влияет на различные звенья нервной системы и психоэмоциональную сферу мужчины, что часто приводит к развитию сексуальных дисфункций и снижению качества жизни.
Стандартные терапевтические подходы к лечению хронического простатита включают антибактериальные, противовоспалительные, спазмолитические, обезболивающие препараты, витаминотерапию и физиотерапевтические методы. В последние годы всё большее внимание уделяется иммуномодулирующим средствам, способным стимулировать защитные механизмы организма.
Перспективным направлением в лечении заболеваний предстательной железы стало применение пептидных биорегуляторов, выделенных из предстательной железы крупного рогатого скота. Клинический опыт использования таких препаратов, как раверон, витапрост, простатилен и уропрост, демонстрирует высокую эффективность органотропных пептидов в терапии хронического простатита и доброкачественной гиперплазии предстательной железы.
В настоящее время пристальное внимание исследователей и клиницистов привлекают аминокислоты и микроэлементы, обладающие лечебным потенциалом в отношении заболеваний мочеполовой системы.
Аргинин является полуфункциональной аминокислотой, регулирующей деятельность мочеполовой системы, активно участвующей в процессах сперматогенеза и способствующей улучшению эректильной функции. Более того, аргинин служит субстратом для синтеза оксида азота – важнейшего медиатора вазодилатации, что особенно значимо для обеспечения адекватного кровоснабжения органов малого таза у мужчин.
Глицин, простейшая аминокислота, обладает иммуномодулирующими, альфа-1-адреноблокирующими, антиоксидантными и детоксицирующими свойствами, а также регулирует активность глутаматных (NMDA) рецепторов. Глицин и ГАМК-ергические механизмы играют существенную роль в контроле тонуса мочевыводящих путей и предстательной железы, что обосновывает применение препаратов, содержащих глицин, при заболеваниях простаты.
Исключительную роль в функционировании предстательной железы и мужской репродуктивной системы играет цинк. Этот микроэлемент не только является компонентом многих ферментных систем, но и обеспечивает бактерицидные свойства простатического секрета, участвует в метаболизме тестостерона и других андрогенов, а также обладает противовоспалительным действием.
Учитывая многогранные фармакологические эффекты пептидов предстательной железы, аргинина, глицина и цинка, было предложено создание нового комбинированного препарата для лечения заболеваний предстательной железы – простатилена® АЦ в форме ректальных суппозиториев.
Материалы и методы исследования
Экспериментальная работа проводилась на 40 аутбредных крысах-самцах линии Sprague-Dawley массой 180-200 г. Животные были распределены на четыре равные группы по 10 особей: интактные животные (1-я группа), контрольная группа с моделью простатита без лечения (2-я группа), животные с простатитом, получавшие препарат сравнения витапрост (3-я группа), и животные с простатитом, получавшие исследуемый препарат простатилен® АЦ (4-я группа).
Для моделирования хронического простатита использовали методику ректального введения смеси 10% раствора димексида в воде со скипидаром в объемном соотношении 4:1. Непосредственно перед применением смесь энергично встряхивали в течение 1 минуты до образования мелкодисперсной эмульсии. Животным, находящимся в горизонтальном положении, вводили 1 мл свежеприготовленной эмульсии на глубину 20-25 мм с помощью специального атравматичного дозатора для ректальных вливаний.
Исследуемые препараты начинали вводить через 28 дней после моделирования патологического процесса, когда формировался хронический простатит. Курс лечения составил 30 дней. Тестируемые средства вводили индивидуально каждому животному в виде расплавленных суппозиториев с помощью атравматического зонда в следующих дозах: витапрост – 120 мг/кг, простатилен® АЦ – 190 мг/кг. Дозировки рассчитывали на основании максимальной суточной дозы для человека с учетом коэффициентов пересчета на грызунов.
Для оценки уродинамических показателей определяли спонтанный суточный диурез, используя индивидуальные обменные клетки фирмы «Techniplast» (Италия). Измерения проводили дважды: перед началом терапии (через 28 дней после индукции простатита) и по окончании лечения (на 58-59 день эксперимента). В собранной суточной моче определяли уровень экскретируемого белка методом количественной турбидиметрии.
После сбора мочи животных декапитировали под легкой фторотановой анестезией. Кровь собирали в вакуумные пробирки с активатором свертывания «Vacutest SER» («Vacutestkima», Италия). Образцы инкубировали при 37°C в течение 30 минут, затем охлаждали 1 час при температуре +4°C и центрифугировали при 2050 об/мин. Полученную сыворотку переносили в пробирки Microtubes Eppendorf («Plastibrand», Германия) для последующего биохимического анализа.
В сыворотке крови определяли:
- Уровень тестостерона методом иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы ХЕМА
- Содержание оксида азота (NOx) методом фотометрии по реакции Грисса при длине волны 520 нм
- Концентрацию продуктов перекисного окисления липидов – малонового диальдегида (ТБК-реактивных продуктов) методом фотометрии при 537 нм и гидроперекисей липидов
- Уровень С-реактивного белка (СРБ) методом иммуноферментного анализа с применением наборов фирмы BD
- Содержание церулоплазмина методом фотометрии по Ревину
- Активность простатической кислой фосфатазы методом кинетической фотометрии с использованием наборов фирмы «Ольвекс Диагностикум»
Для гистологического исследования использовали вентральную часть предстательной железы крыс. Образцы тканей фиксировали в 10% нейтральном формалине, проводили через серию растворителей согласно стандартному протоколу и заливали в парафин. Срезы тканей толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином для последующего морфологического анализа.
С целью объективной оценки выраженности воспалительных изменений в предстательной железе была разработана 5-балльная шкала: 1 балл – незначительные очаги фиброза, интерстициальной лимфоцитарной и гистиоцитарной инфильтрации; 2 балла – очаги хронического воспаления с преимущественно интерстициальной инфильтрацией, занимающие менее 1/4 площади среза железы; 3 балла – воспалительные очаги с крупными инфильтратами вокруг протоков, ацинусов и кровеносных сосудов, наличие лейкоцитов в просветах желез, поражение 1/4-1/2 площади среза; 4 балла – выраженный простатит с вовлечением 1/2-3/4 среза железы; 5 баллов – тяжелый простатит с поражением более 3/4 площади среза.
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с использованием стандартного пакета программ Microsoft Excel. Достоверность различий между группами оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
В ходе исследования было установлено, что моделирование экспериментального простатита сопровождалось развитием значимых изменений диуреза у крыс через 28 суток после введения флогогенной смеси. Во всех опытных группах суточный диурез через 28 дней после моделирования простатита был снижен более чем на 40% по сравнению с показателями интактных животных. Кроме того, зарегистрировано существенное увеличение экскреции белка с мочой (в 5,4 раза), что объясняется выходом воспалительного экссудата в просвет уретры и попаданием его компонентов в мочу.
По мере прогрессирования и нарастания тяжести простатита в контрольной группе животных наблюдалось дальнейшее снижение диуреза и увеличение протеинурии. На фоне терапии как витапростом, так и простатиленом® АЦ отмечалось значительное улучшение функциональных показателей мочеиспускания. Диурез восстанавливался до близких к норме значений, а уровень экскреции белка с мочой существенно снижался по сравнению с контрольной группой.
Однако следует отметить, что в группе животных, получавших простатилен® АЦ, наблюдалась более выраженная нормализация исследуемых показателей. Так, к концу курса лечения суточный диурез в этой группе составил 92,3% от уровня интактных животных, в то время как в группе витапроста данный показатель достигал 87,4%. Протеинурия в группе простатилена® АЦ снизилась в 2,7 раза по сравнению с контролем, в то время как на фоне витапроста – в 2,3 раза.
При анализе биохимических показателей было установлено, что развитие простатита сопровождается активацией процессов перекисного окисления липидов и формированием нитрозативного стресса, которые играют существенную роль в повреждении клеточных мембран предстательной железы.
В контрольной группе животных с нелеченым простатитом уровень оксида азота (NOx) в сыворотке крови был повышен в 2,2 раза по сравнению с интактными крысами, что свидетельствовало о выраженности нитрозативного стресса. Параллельно наблюдалось увеличение концентрации ТБК-реактивных продуктов (преимущественно малонового диальдегида) в 2,4 раза, отражающее интенсификацию процессов липопероксидации.
Терапия витапростом способствовала уменьшению выраженности оксидативных процессов, что проявлялось достоверным снижением как уровня оксида азота (на 37,3% по сравнению с контролем), так и ТБК-реактивных продуктов (на 32,5%). Применение простатилена® АЦ оказывало сопоставимое с витапростом действие на маркеры оксидативного стресса, однако с несколько более выраженным эффектом в отношении снижения уровня ТБК-реактивных продуктов (на 38,2% по сравнению с контролем).
Активность воспалительного процесса оценивали по уровню белков острой фазы – церулоплазмина и С-реактивного белка (СРБ). В условиях моделирования хронического простатита наблюдалось значительное повышение концентрации обоих показателей: церулоплазмин увеличивался в 2,4 раза, а СРБ – в 2,2 раза по сравнению с интактными животными.
Курсовое введение витапроста способствовало снижению содержания церулоплазмина в 2,2 раза и СРБ в 1,6 раза относительно контрольной группы. В свою очередь, применение простатилена® АЦ приводило к более выраженному противовоспалительному эффекту, о чем свидетельствовало уменьшение уровня церулоплазмина в 2,5 раза и СРБ в 1,8 раза.
Для оценки специфических биохимических маркеров простатита определяли активность простатической кислой фосфатазы и уровень тестостерона в сыворотке крови экспериментальных животных.
В контрольной группе с нелеченым простатитом отмечалось выраженное повышение активности простатической кислой фосфатазы (в 3,5 раза по сравнению с интактными животными), что свидетельствовало о структурном повреждении ткани предстательной железы и выходе внутриклеточного фермента в кровоток. Одновременно наблюдалось снижение уровня тестостерона в 1,9 раза, что могло быть связано с нарушением функциональной активности как самой предстательной железы, так и гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы в целом.
Терапия витапростом приводила к снижению активности простатической кислой фосфатазы в 1,7 раза по сравнению с контролем и повышению уровня тестостерона на 46,2%. Применение простатилена® АЦ оказывало более выраженное действие на активность кислой фосфатазы, снижая ее в 2,1 раза относительно контроля, однако влияние на уровень тестостерона было несколько менее выраженным – повышение составило 35,6%.
Эти данные свидетельствуют о том, что простатилен® АЦ обладает более мощным протективным действием в отношении структурной целостности предстательной железы, в то время как витапрост в большей степени влияет на гормональный статус.
Хронический простатит сопровождался значительным увеличением массы вентральной части предстательной железы крыс. В контрольной группе животных масса простаты возрастала в 1,48 раза по сравнению с интактными животными. Увеличение размеров железы происходило преимущественно за счет отека и гиперемии тканей, что негативно влияло на уродинамику и являлось основной причиной дизурических расстройств.
Курсовое лечение исследуемыми препаратами в течение одного месяца способствовало нормализации массы предстательной железы. При этом эффект простатилена® АЦ оказался значительно более выраженным. Так, в группе животных, получавших витапрост, масса простаты снизилась на 21,3% по сравнению с контролем, в то время как на фоне применения простатилена® АЦ данный показатель уменьшился на 31,7%.
Гистологическое исследование тканей предстательной железы позволило провести полуколичественную оценку выраженности воспалительных изменений. В контрольной группе средний балл по разработанной шкале составил 3,9±0,27, что соответствовало выраженному простатиту с поражением значительной части железы. Терапия витапростом снижала интенсивность воспаления до 2,5±0,22 баллов, а применение простатилена® АЦ – до 1,7±0,21 баллов.
Микроскопическое исследование показало, что в контрольной группе наблюдались выраженные дистрофические и воспалительные изменения эпителия желез, интерстициальный отек, густая лимфоцитарно-гистиоцитарная инфильтрация вокруг протоков и ацинусов, а также скопления нейтрофилов в просветах желез. После курса лечения витапростом отмечалось уменьшение воспалительной инфильтрации, частичное восстановление структуры эпителия желез и снижение интерстициального отека. В группе животных, получавших простатилен® АЦ, гистологическая картина характеризовалась минимальными воспалительными изменениями, преимущественно нормальной структурой эпителия, небольшими очагами лимфоцитарной инфильтрации и практически полным отсутствием отека.
Результаты проведенного исследования демонстрируют высокую эффективность нового комбинированного препарата простатилен® АЦ при экспериментальном простатите у крыс. По большинству исследованных параметров простатилен® АЦ превосходил эффективность препарата сравнения витапрост, что можно объяснить синергическим действием компонентов, входящих в его состав.
Комплекс регуляторных пептидов предстательной железы, присутствующий в обоих препаратах, обладает органотропным действием, улучшает микроциркуляцию, нормализует метаболические процессы в ткани предстательной железы и обладает иммунорегуляторным эффектом. Однако дополнительное включение в состав простатилена® АЦ комплекса цинка аргинил-глицината (Н17N5О4Zn) позволяет расширить спектр фармакологического действия.
Аргинин, как известно, является предшественником оксида азота, который в физиологических концентрациях улучшает микроциркуляцию в органах малого таза. В условиях воспаления происходит избыточная продукция оксида азота, что подтверждается повышением его уровня в контрольной группе животных с нелеченым простатитом. Однако экзогенное поступление аргинина в составе препарата парадоксальным образом способствует нормализации содержания оксида азота, вероятно, за счет регуляции активности различных изоформ NO-синтазы и подавления индуцибельной NO-синтазы, ответственной за гиперпродукцию NO при воспалении.
Глицин, входящий в состав простатилена® АЦ, обладает не только иммуномодулирующими свойствами, но и альфа-1-адреноблокирующим действием, что особенно важно для нормализации уродинамики. Известно, что при хроническом простатите происходит активация симпатической нервной системы с повышением тонуса гладкомышечных структур предстательной железы и шейки мочевого пузыря, что вносит существенный вклад в формирование дизурических расстройств. Глицин, модулируя активность адренорецепторов, способствует расслаблению гладкой мускулатуры и улучшению оттока мочи, что подтверждается более выраженной нормализацией диуреза в группе животных, получавших простатилен® АЦ.
Цинк, представленный в препарате в виде хелатного комплекса, обладает выраженными противовоспалительными и антиоксидантными свойствами. Он является кофактором более 300 ферментов, в том числе супероксиддисмутазы – ключевого фермента антиоксидантной защиты. Этим можно объяснить более значимое снижение уровня продуктов перекисного окисления липидов в группе животных, получавших простатилен® АЦ. Кроме того, цинк участвует в регуляции апоптоза и пролиферации клеток, что может способствовать восстановлению нормальной архитектоники ткани предстательной железы и уменьшению воспалительных изменений.
Интересно отметить, что простатилен® АЦ оказывал менее выраженное влияние на уровень тестостерона по сравнению с витапростом. Возможно, это связано с более избирательным действием препарата на локальные процессы в предстательной железе, в то время как витапрост в большей степени влияет на системные механизмы регуляции функции репродуктивной системы.
Морфологические исследования тканей предстательной железы подтвердили более высокую эффективность простатилена® АЦ в отношении уменьшения воспалительных изменений и восстановления нормальной структуры органа. Это может быть обусловлено комплексным действием всех компонентов препарата на различные звенья патогенеза хронического простатита.
Полученные результаты согласуются с данными других исследователей, изучавших эффективность пептидных биорегуляторов при заболеваниях предстательной железы. Так, в работах Ткачука В.Н. и соавт. (2010) было показано, что применение простатилена при хроническом простатите способствовало уменьшению болевого синдрома, дизурических расстройств и улучшению качества жизни пациентов. Исследования Аль-Шукри С.Х. и соавт. (2012) продемонстрировали высокую эффективность витапроста при доброкачественной гиперплазии предстательной железы, что проявлялось улучшением показателей урофлоуметрии и уменьшением объема остаточной мочи.
Важным преимуществом простатилена® АЦ является ректальный путь введения в виде суппозиториев, что обеспечивает высокую биодоступность действующих веществ и их целенаправленное поступление в предстательную железу благодаря особенностям венозного оттока от прямой кишки. Кроме того, такая лекарственная форма позволяет избежать первичного прохождения препарата через печень и, следовательно, минимизировать риск развития системных побочных эффектов.
Перспективы применения комбинированных препаратов в лечении простатита
Хронический простатит остается одной из наиболее сложных проблем современной урологии, требующей комплексного подхода к диагностике и лечению. Как мозаика, составленная из множества фрагментов, патогенез этого заболевания включает нарушения микроциркуляции, застойные явления, изменения биохимического состава секрета простаты, иммунные нарушения и инфекционные факторы. Соответственно, и терапевтическая стратегия должна быть направлена на коррекцию всех звеньев патологического процесса.
Проведенное исследование показало, что новый комбинированный препарат простатилен® АЦ, содержащий комплекс регуляторных пептидов предстательной железы и хелатное соединение цинка аргинил-глицината, эффективно воздействует на ключевые патогенетические механизмы простатита. Подобно опытному дирижеру, управляющему оркестром, простатилен® АЦ гармонизирует множество биохимических и физиологических процессов в предстательной железе, способствуя восстановлению ее нормальной структуры и функции.
Результаты открывают новые горизонты в лечении заболеваний предстательной железы и становятся еще одним шагом на пути к созданию высокоэффективных комбинированных препаратов с минимальным количеством побочных эффектов. Как в живописи смешение различных красок позволяет создать новые оттенки и добиться более глубокого художественного эффекта, так и в фармакологии комбинация активных компонентов с взаимодополняющим действием позволяет получить более выраженный терапевтический результат.
Дальнейшие клинические исследования позволят определить место простатилена® АЦ в арсенале средств для лечения хронического простатита и других заболеваний предстательной железы, а также оценить его эффективность в различных клинических ситуациях. Возможно, в будущем появятся новые модификации препарата, адаптированные для лечения конкретных форм простатита или ориентированные на определенные возрастные группы пациентов.
Полученные данные свидетельствуют о том, что создание комбинированных препаратов на основе регуляторных пептидов и физиологически активных соединений представляет собой перспективное направление в разработке лекарственных средств для лечения заболеваний предстательной железы. Как показало экспериментальное исследование, простатилен® АЦ не только эффективно устраняет воспаление и нормализует структуру железы, но и благоприятно влияет на функциональные показатели мочеиспускания, что имеет решающее значение для улучшения качества жизни пациентов с хроническим простатитом.
